
核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸来自二酯键,在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,称为脱氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶专一性较低,既能作用于RNA也能作用于DN空么胜讨范心还阶许A,因此统称为核酸酶(nuclease)。根据核酸酶作用的位置不同,又可将核酸酶分为核酸外切酶360百科(exonuclease)和核酸内切酶(endonucle联影味伯ase)。
- 中文名称 外切核酸酶
- 外文名称 exonuclease
- 作用 水解
基本介绍
一、核酸外切酶
医草如般有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸,所以杨境可屋部里领曾承称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核来自酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷360百科酸,称为3′→5′外切酶,例如,蛇毒磷酸二酯酶即是一种3′→5′外切酶,端成确谈果晶演里水解产物为5′核苷酸;核酸外切解酶从5′端开始逐个水解核苷酸维成故养,称为5′→3′外切酶,例如:牛脾磷酸二酯酶即是一种5′→3′外切酶,水解产物为3′核苷酸。
二、核酸内切酶
核酸内切酶催化水解多核苷酸内沉喜盾群推部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-内切酶;而有些仅水解3′-磷酸二酯键,把磷酸基团留在5′位置上,称为3′-内切酶。还有一些核酸内切酶对磷酸酯键一侧的碱基有专一要求,例如胰脏核糖核酸酶(RNaseA)即是一种高度专一性核酸内切酶,它作用于嘧啶核所守村迅培牛助苷酸的C′3上的磷酸根和相邻核苷酸的C′5之间的键,产物为3′嘧啶单核苷酸或以3′嘧啶核苷酸结尾的低聚核苷酸。
种类
20世纪70年代,在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶,能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序,称为限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,简称限制酶)动称北浓。当外源DNA侵入细菌后,限制性内切酶可将其水解切成片段,从而限制了外源DNA呀零达针小在细菌细胞内的表达,而细菌手本身的DNA由于在该特脚训汽款击航六语异核苷酸顺序处被甲基化酶修兰汉至失饰,不被水解,从而得到保护。
限制性核酸内切酶的研究和应用发展很快,目前已提纯爱丝副看停的限制性核酸内切酶有100多种,许多已成为基因工程研究中必不可少的工具酶。
限制性核酸内切酶可被分成三种诉境流级事温愿培亮类型。Ⅰ型和Ⅲ型限制酶水解DNA需要消耗ATP,全酶套具蒸受李亚易述判中的部分亚基有通过在特殊碱基上补加甲基基团对DNA进行化学修饰的活性。
Ⅰ型和Ⅲ型酶具有限制和修饰两种作用,而特异性弱,切割位点的序列不固定阻输批良日古率苦,不已知,不宜用于基因克胜粒井同帝乱院军假万隆中。
Ⅱ型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲基化或其它方式照余修饰DNA,能在所识别的特殊核苷酸顺序内或附近切割DNA。因此,被广泛用于DNA分子克隆和序列测定。
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