免疫沉淀法

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免疫沉淀法(Immunopre来自cipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术,这种技术是将蛋白质视为抗原,并360百科利用抗体与之进行特异性结合的特性,来进行研究。这项技术可用来将含有上千种不同没协步青作杨高蛋白质的样品中,分离和浓缩出特定蛋白质。进行免疫沉淀法时,抗体需要和建切倍木一个受质结合。

  • 中文名称 免疫沉淀法
  • 外文名称 Immunoprecipitation
  • 类型 个别免疫沉淀法

类型

  个别免疫沉淀法(IP):用来分离某个细胞萃取物中的已知特定蛋白质

  免疫共沉淀法(Co-IP):研究整个蛋白质复合体

  染色质免疫沉淀法(ChIP):用来研究DNA上的特定蛋白质

  RNA免疫沉淀法(RIP):和ChIP相近,但RNA免疫什针触我掉流史吗沉淀法是用来研究会与RNA结合的蛋白质

  RIP技术(RNA Binding Prot期员即神令检记余ein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。RIP这种新兴的技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然来自后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分360百科析。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物,RIP实验的优化条件与ChIP实验不太相同(如复合物不需要固定,RI带收如养源条神P反应体系中的试剂和抗体绝对不能含有RNA酶,抗体需经RIP实验验证等等)。RIP技术下游结合microarray技术被称为RIP-Chip,帮助我们更高通量地了解癌症针确练处括销手乙同担以及其它疾病整体水平的RNA变化属预定宽取南下

  Millipore基于磁珠的RIP实验流程

基本原理

  RIP 树坏依蛋列器式实验基本原理:

  1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性哥行胜论记希伯顾宗衣胡的RNA结合蛋白。

  2. 防止非特异性的RNA的结合。

  3. 免疫沉淀把RNA结合美器蛋白及其结合的RNA一起分离出来。

  4.结合的RNA序列通过microarray(RIP-C反些投且具书烈倒草深散hip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。

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