构建的shRNA真核表达来自载体或者mirshRNA真核表达载体，由于载体上均带有LR同源重组臂，所以这些载体均可作为YRBIO腺病毒包装系统中的穿梭载360百科体使用。如果目的细胞质粒转染效率较低，则可直接以这些载体为基础包装腺世色粮铁独足案象病毒，利用腺病毒感染目的细胞。

• 中文名 shRNA真核表达载体构建
• 缺    点 载体上没有荧光标记。
• 优    点 可以选择构建一条或者多条
• 别    称 mirshRNA真核表达载体

基本简介

　　YRBIO-shRNA表达系来自统

　　作为RNA干扰实验的第错消许还一步，靶位点的选择，以及相应的shRNA表达载体构建，是整个RNA干扰实验的重中之重。靶位点选择恰当，shRNA干当形环慢草扰效率高，整个RNA干角据福害逐扰实验就能够事半功倍，否则，就会做许多无用功。

　　shRNA表达载体构建后均可作为YRBIO腺病毒包装系统洲阻行其烧孩中的穿梭载体使用。如果目的细胞质粒转染效率较低，则可直接以这些载体为基础包装腺病毒，利用腺病毒感染目的细胞。

　　有许多免费软件或网站能360百科够提供靶位点选择及shRNA序列设计，但是这种免费软件算法落后，设计出的shRNA序列有效率只有25%~3查孔0%左右。与之相对应的，是一些商态各制关笔针当业化软件，或者现成的商业化shRNA库，由于其算法先进，设计原则合素妈足样怀余食谁略似理，其提供的shRNA序列的有效率通常能达到75%以上，亦即可以达到每四条shRNA有三条有效。

　　基于以上，YRBIO系统在国内率先引进代表RNA干扰领域全球顶尖水准的TRC(The RNAi，RNA干扰协会)开发的TRC shRNA库。该库针对人、小鼠、大鼠等数万升简止西容径面财个基因，每个基因旧高数整最找成础移误提供3~5条shRNA已手(已构建至载体上)，总数达五万多条，且数量还在不断增加。经过大规模实验验证，其中超过75%均为有效shRNA，其干扰效率均大于70%(大多数超过80%)。

　　以此shRNA库为基础跑入方例味晚增山架古空，针对每个基因，可提供3~5条高质量的shRNA序列，并且构建到除组几shRNA真核表达载体上。由于此数据库中族下适机的shRNA序列有效性超过75%，亦即理论上来说，每一套shRNA克隆中，必定至少有一条shRNA的干扰效率超过70%。右图为携带绿色荧光的shRNA真核表达载体pYr-1.1-hU6-EGFP质粒图谱 (attL1和attL2为腺病毒重组位点)。

　　只需事先了解需要干扰的目的基因混州香好价含答明露最，我们就会为您从伟演温继攻依采数据库中调取相应的shRNA序列信息，然后，您可以选择合适的sh合向RNA表达系统来表达shRNA，进行RNA干扰实验。

　　选择需要干扰的目的基因，从数据库中调取相应的shRNA序列信息，然后，选择合适的shRNA表达系统来表达shRNA。

　　YRBIO系统提供的shRNA真核表达载体，共有hU6、mU6稳诉律假七接杆仅钟、hH1、h7SK等四种polIII型启动子可供选择，可选择携带荧光(包括绿色荧光、红色荧光)或不携带荧光。除此之外，还时鱼头职书提供mirshRNA真核表达载体，可以进行mirshRNA真核表达载体构建。

　　利用腺病毒的高感染效率、高表达效率，更好地进行RNA干扰研究实验!

　　既可以用来当普通的shRNA真核表达载体用，同时又是穿梭载体，可以拿来包装腺病毒，而且其干扰有效性、干扰效率大部分都超过 80%!

　　选用YRBIO-shRNA表达系统，具有如下优点:

　　(1)shRNA序列数据依然来自国外成熟shRNA数据库，质量有保证。RNA干扰效率的高低主要取决于靶位点的选择、shRNA序列的设计，而由于YRBIO所采用的shRNA序列来自国外成熟shRNA数据库，算法先进，靶位点成功率高，所以shRNA的干扰成功率非常高。

　　(2)您可以选择构建一条或者多条，灵活度高。

　　(3)多种启动子，有荧光或无荧光，绿色荧光或红色荧光等可自由选择，以更好地配合后续实验。

　　(4)载体可作为普通shRNA表达载体使用，亦可作为腺病毒包装系统的穿梭载体使用，以进行腺病毒包装。

　　右图为不携带荧光的shRNA真核表达载体pYr-2.1-hU6质粒图谱(attL1和attL2为腺病毒重组位点)。

表达系统

　　此shRNA数据库亦有一套原装进口的shRNA表达系统相匹配，针对每个基因的一套shRNA序列均已构建至相应的shRNA表达载体上，可直接使用,整套产品均为原装进口。

　　此系统中，装载shRNA序列的真核表达载体，同时也是YRBIO第三代慢病毒包装系统中的穿梭载体。也就是说，如果目的细胞质粒转染效率较低，那么只需相应的慢病毒包装系统中的包装质粒、转染试剂、293T包装细胞，便可以将这些shRNA包装慢病毒，利用慢病毒的高感染效率、高表达效率、长期表达特性，更好地进行RNA干扰研究实验!

　　右图为shRNA真核表达载体pYrbio-LT-1质粒图谱

　　选用原装进口shRNA表达系统，具有:

　　优点:

　　(1)原装进口产品，未做任何改动。

　　(2)装载shRNA序列的真核表达载体，同时也是慢病毒包装系统中的穿梭载体，可用以包装慢病毒。

　　缺点:

　　(1)载体上没有荧光标记。

　　(2)载体骨架稍微有点大，有7K左右。

TRC库

　　TRC(The RNAi，RNA干扰联盟)是由麻省理工学院和Harvard牵头建立的合作机构，包括Massachusetts General Hospital、Harvard Med school、Dana Farbe封敌识危责死毛r Cancer Inst、The Broad Institute、Whitehead Institute、MIT、Academica Sinica (Taiwan)和另外5个国际性组织，代表着RNA干扰领域的全球最顶尖水平。该组织计划在3年内构建数量达15,000个人类基因和15,000个小鼠基因的shRNA文库。第1版来自的TRC shRNA文库包括35,000 shRNA克隆(其中人类基因有5300个，小鼠基因有2200个)，其它新构建的克隆每个季度会陆续公布。